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從(cong)植物(wu)標(biao)本(ben)中提取的DNA是高度片(pian)段化的,因此提取短(duan)DNA分子(zi)的提取步驟(zou)非常嚴(yan)格。動物(wu)尸體DNA的提(ti)取(qu)方法(fa)和DNA文庫制(zhi)備方(fang)法的改進,已經能夠有效提取小于50bp的DNA分子片(pian)段。因此,德國科學家Rafal M. Gutaker等將這些改進方(fang)法應用到植物標本的DNA提取,并通過(guo)測序評(ping)估提取性能(neng),該(gai)方(fang)法能(neng)夠對(dui)DNA片段長度的分布進(jin)行(xing)準確評估。與使用(yong)十六烷(wan)基(ji)*基(ji)溴化銨(CTAB)提取相比,使用N-笨甲(jia)酰溴(PTB)緩沖液提取的中(zhong)間片段長度(du)減(jian)少(shao)35%,改進DNA與(yu)硅(gui)膜的結(jie)合條件(jian)可以額外(wai)減少10%。他們并未(wei)觀察到單鏈(lian)DNA長(chang)度(du)的進一步降低和雙(shuang)鏈(lian)DNA文庫(ku)的制備(bei)方法。這種方法能夠(gou)從植(zhi)物標本中提(ti)取(qu)超短分子,這將幫助開啟(qi)儲存在(zai)標本室的遺傳信息(xi)。
原文:
Rafal M. Gutaker , Ella Reiter , Anja Furtwängler . Extraction of ultrashort DNA
molecules from herbarium specimens. BioTechniques 62:76-79 (February 2017).