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采(cai)用PCR或等(deng)溫(wen)擴(kuo)增的(de)(de)(de)方法來擴(kuo)增DNA（或RNA）時，反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)溫(wen)度在(zai)(zai)50℃以(yi)上(shang)，反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)體(ti)(ti)積(ji)介于(yu)(yu)10-100 ul之間，并且可(ke)(ke)能需(xu)(xu)要(yao)(yao)在(zai)(zai)樣品上(shang)覆蓋一層(ceng)油性物(wu)質或采(cai)取(qu)相似的(de)(de)(de)封閉操作。這(zhe)是(shi)因為，在(zai)(zai)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)的(de)(de)(de)過(guo)程(cheng)中伴隨的(de)(de)(de)蒸發現象致使(shi)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)體(ti)(ti)積(ji)不(bu)可(ke)(ke)過(guo)小，另一方面，較大(da)的(de)(de)(de)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)體(ti)(ti)積(ji)會消耗(hao)更(geng)多的(de)(de)(de)耗(hao)材，并且在(zai)(zai)循環擴(kuo)增過(guo)程(cheng)中無法有(you)(you)效的(de)(de)(de)進行(xing)(xing)溫(wen)度控制（達到預定的(de)(de)(de)溫(wen)度需(xu)(xu)要(yao)(yao)較長(chang)的(de)(de)(de)時間）。TwistDx’s提出的(de)(de)(de)重組酶聚合酶擴(kuo)增（RPA）技(ji)(ji)術對(dui)這(zhe)一難(nan)題給出了解決方案。重組酶聚合酶擴(kuo)增反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)可(ke)(ke)在(zai)(zai)低(di)(di)溫(wen)（通(tong)常在(zai)(zai)37-42℃，可(ke)(ke)以(yi)在(zai)(zai)更(geng)低(di)(di)溫(wen)度下(xia)進行(xing)(xing)）下(xia)進行(xing)(xing)，反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)迅速，用時短（通(tong)常在(zai)(zai)3-15 min完成(cheng)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)），即便(bian)不(bu)在(zai)(zai)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)體(ti)(ti)系上(shang)覆蓋油層(ceng)或采(cai)取(qu)其它的(de)(de)(de)密(mi)(mi)封措施仍可(ke)(ke)大(da)大(da)降低(di)(di)蒸發造成(cheng)的(de)(de)(de)影響(xiang)。低(di)(di)溫(wen)運行(xing)(xing)，可(ke)(ke)有(you)(you)效防(fang)止背景噪聲，使(shi)結果(guo)(guo)更(geng)，即便(bian)需(xu)(xu)要(yao)(yao)更(geng)長(chang)的(de)(de)(de)時間達到*反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)溫(wen)度也不(bu)會影響(xiang)實驗(yan)(yan)結果(guo)(guo)。因此，RPA技(ji)(ji)術的(de)(de)(de)優(you)點在(zai)(zai)于(yu)(yu)，既可(ke)(ke)用于(yu)(yu)微(wei)體(ti)(ti)積(ji)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)（數字方法），也可(ke)(ke)用于(yu)(yu)大(da)體(ti)(ti)積(ji)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)體(ti)(ti)系，例如(ru)具有(you)(you)簡單生物(wu)樣本(ben)的(de)(de)(de)低(di)(di)復(fu)雜性分子檢測(ce)。文中展示了RPA技(ji)(ji)術用于(yu)(yu)不(bu)同體(ti)(ti)積(ji)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)體(ti)(ti)系的(de)(de)(de)實驗(yan)(yan)結果(guo)(guo)，反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)在(zai)(zai)標(biao)準的(de)(de)(de)PCR管（0.2 ml）中進行(xing)(xing)，各(ge)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)(ying)體(ti)(ti)系均未采(cai)取(qu)油密(mi)(mi)封或其它密(mi)(mi)封操作。

原文：

Recombinase Polymerase Amplification (RPA) an isothermal technique suitable for a range of applications- Evaluation of RPA volume tolerance. BioTechniques 62:190 (April 2017).