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      您是(shi)怎樣對(dui)96孔(kong)板(ban)進行鋪板(ban)的(de)(de)(de)?當細(xi)胞(bao)(bao)用(yong)96孔(kong)板(ban)接種時，細(xi)胞(bao)(bao)經常是(shi)不(bu)均勻(yun)分布。第二天(tian)就會發現(xian)有些地方出現(xian)堆積性生長，而還有不(bu)少地方細(xi)胞(bao)(bao)則(ze)很(hen)稀疏，細(xi)胞(bao)(bao)密集的(de)(de)(de)地方因(yin)細(xi)胞(bao)(bao)與細(xi)胞(bao)(bao)之間的(de)(de)(de)接觸(chu)抑制(zhi)影響細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)生長，這(zhe)樣就很(hen)難評價干(gan)預因(yin)素對(dui)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)。因(yin)此(ci)，將96孔(kong)板(ban)種均勻(yun)也是(shi)進行后(hou)續實驗的(de)(de)(de)前(qian)提，現(xian)將以(yi)前(qian)用(yong)的(de)(de)(de)老辦(ban)法(fa)和最后(hou)用(yong)的(de)(de)(de)新方法(fa)比(bi)較一下(xia)，以(yi)讓(rang)大家(jia)看看各自優缺。

　　1、老(lao)方(fang)法：植板(ban)(ban)后，用手拿起96孔板(ban)(ban)，左右搖動(dong)，然后來(lai)回(hui)搖動(dong)幾(ji)次，但這種方(fang)法通常(chang)在(zai)2-3個細胞的5口(kou)井中(zhong)分(fen)(fen)布(bu)不均勻。 在(zai)大多數情況下，中(zhong)間(jian)的孔會出現成堆的分(fen)(fen)布(bu)，會讓人(ren)感到一陣麻煩(fan)。 再一次，看(kan)到一位(wei)老(lao)師將(jiang)電路(lu)板(ban)(ban)放(fang)在(zai)振(zhen)動(dong)器上(shang)并搖動(dong)幾(ji)分(fen)(fen)鐘。 結果(guo)更(geng)糟。 細胞都(dou)在(zai)中(zhong)間(jian)。

　　通常，會在96孔板的(de)每(mei)個孔上(shang)，加(jia)入100微升的(de)細(xi)胞懸(xuan)浮(fu)液。把它從左(zuo)邊(bian)加(jia)到(dao)洞(dong)底。加(jia)入一半(ban)(ban)板材(cai)后(hou)，與(yu)未加(jia)入的(de)細(xi)胞懸(xuan)浮(fu)液混(hun)合，然后(hou)繼續(xu)加(jia)入剩余的(de)一半(ban)(ban)板材(cai)。蓋上(shang)蓋子(zi)后(hou)，用左(zuo)手(shou)輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)握(wo)住木板的(de)左(zuo)邊(bian)，然后(hou)用右手(shou)輕(qing)(qing)拍(pai)木板的(de)右邊(bian)緣。注意力(li)集中在力(li)量上(shang)(通常敲擊它三(san)次(ci))。太多或太多次(ci)會導致細(xi)胞堆積。順時(shi)針轉動盤子(zi)(逆時(shi)針方向不好) ，將剩下的(de)三(san)面逐一拍(pai)打，靜(jing)置(zhi)5分鐘左(zuo)右，然后(hou)放(fang)入37度的(de)培養箱中。

　　2、新方(fang)法(fa)：這種(zhong)方(fang)法(fa)是非(fei)(fei)常好，非(fei)(fei)常均勻播種(zhong)。使用等速吸(xi)引吸(xi)取細胞，然后(hou)(hou)吸(xi)移嘴(zui)對孔(kong)(注(zhu)意尖不(bu)接(jie)觸孔(kong)槍頭底部(bu))的(de)側壁上(shang)，然后(hou)(hou)再慢(man)(man)慢(man)(man)敲除細胞吸(xi)管(guan)定植(zhi)后(hou)(hou)，不(bu)要(yao)搖(yao)晃板，它只是可(ke)以直接(jie)在顯微鏡下被放置，這個方(fang)法(fa)可(ke)以被說成是有(you)效(xiao)的(de)。

　　補(bu)充：從6孔(kong)板(ban)到96孔(kong)板(ban)，細胞(bao)(bao)應(ying)均勻(yun)(yun)分布分散。用(yong)培養(yang)基進行(xing)稀釋(shi)細胞(bao)(bao)，然(ran)(ran)后(hou)將(jiang)培養(yang)板(ban)放置在適當的位置。添(tian)加一(yi)個細胞(bao)(bao)時和之后(hou)，請勿移(yi)動能力培養(yang)板(ban)；如果在空氣中沒(mei)有(you)介質吹入(ru)，但是不要移(yi)動培養(yang)板(ban)，加入(ru)細胞(bao)(bao)后(hou)，靜置20-30分鐘(zhong)，然(ran)(ran)后(hou)可以將(jiang)其移(yi)入(ru)培養(yang)箱。這樣(yang)，細胞(bao)(bao)結構通(tong)常具有(you)均勻(yun)(yun)生長。當然(ran)(ran)，前(qian)提是細胞(bao)(bao)消化系統良好(hao)。