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PII 離子交換纖維素使用說明
點擊次數:5186 更新時間:2015-09-28

離子交換素(su)的特(te)點(dian)

離子(zi)交換(huan)纖維素(su)是以天然(ran)分子(zi)為母(mu)體,借酯化(hua)醚化(hua)或氧(yang)化(hua)等化(hua)學反應(ying),引入(ru)具有酸堿離子(zi)基(ji)團而(er)仍有纖維素(su)結構(gou)的半(ban)合成離子(zi)交換(huan)劑。離子(zi)交換(huan)纖維素(su)一般分為陽離子(zi)交換(huan)纖維素(su)與陰離子(zi)交換(huan)纖維素(su)。應(ying)用較廣的有羥甲基(ji)纖維素(su)(CM-C),二乙胺基(ji)乙基(ji)纖維素(su)(DEAE-C),交聯醇胺纖維素(su)(ECTEOLA-C)和(he)磷酸纖維素(su) PII。其(qi)特點(dian):

1、有極大(da)的(de)表(biao)面(mian)積(ji)和(he)多孔結構(gou)。其有效交換基(ji)團間的(de)空間地位較大(da),易于吸附蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)等(deng)高(gao)分(fen)子(zi)物質(zhi)(zhi)。與離子(zi)交換樹脂相比(bi),它的(de)交換容量(liang)較低(一般為0.2-0.9 毫克當量(liang)/克),但對分(fen)離蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)的(de)高(gao)分(fen)子(zi)物質(zhi)(zhi)已(yi)很適(shi)用。

2、有良好的化(hua)學(xue),物(wu)理(li)穩定(ding)性,使(shi)洗脫劑的選擇(ze)范圍很(hen)廣(guang)。

3、吸(xi)附(fu)生化(hua)高(gao)分(fen)子(zi)的(de)結(jie)合鍵較松,吸(xi)附(fu)與解吸(xi)條件較緩和(he),適于易變性(xing)的(de)蛋白(bai)質、酶、激(ji)素的(de)分(fen)離純化(hua)。

4、分(fen)離能(neng)力很強(qiang),能(neng)將一組(zu)復雜的混合物逐一分(fen)開。

5、能分(fen)離純(chun)(chun)化毫(hao)克至可量的純(chun)(chun)品,適用于(yu)規模生產(chan)。

離子交(jiao)換纖維素的交(jiao)換作用(yong)

離(li)子交換纖(xian)維素(su)對蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)類高分子的(de)吸附作用是通過蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)分子與纖(xian)維素(su)之間的(de)靜電(dian)引(yin)力的(de)互(hu)相吸引(yin),而在 pH 值(zhi)低于蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)的(de)等(deng)電(dian)子點時(shi),陰離(li)子交換纖(xian)維素(su)則(ze)可(ke)吸引(yin)帶負電(dian)荷的(de)蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)。顯然改變 pH 值(zhi)或離(li)子強度也(ye)能(neng)是蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)或離(li)子交換纖(xian)維素(su)改變或失去電(dian)荷,從而使蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)從交換劑上解(jie)吸下來。但(dan)應在蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)的(de)穩定(ding) pH 值(zhi)范圍內進行。

離子(zi)交換(huan)纖維素的使用和(he)處理

陰(yin)離子交換纖(xian)維(wei)素(su) DEAE-C 等主(zhu)要用(yong)于中性(xing)和性(xing)蛋(dan)白質的分離,陰(yin)離子交換纖(xian)維(wei)素(su) PII, CMC 等主(zhu)要用(yong)于中性(xing)或堿性(xing)蛋(dan)白質的分離。

1、新購的 PII 先用(yong) 1M NaOH 調勻,侵泡 5 分鐘,靜置傾去細粉,抽干。

2、加入(ru) 4 倍體積 1M HCL 侵泡 1 小時,蒸餾水洗至中性,抽干。

3、用 4 倍體積 1M NaOH 侵泡 1 小時(shi),水洗至(zhi)中性(xing),抽干(gan)。

4、用配制樣(yang)品(pin)用的緩沖液充分平衡。

PII 再生(sheng)

先用(yong)(yong)蒸餾(liu)水沖洗干凈后,再(zai)用(yong)(yong) 1M NaOH 洗滌殘留蛋白質(zhi),然后用(yong)(yong)水洗至中性,必要時重復上述處理。陽離子(zi)(zi)交(jiao)換纖維(wei)素也可以(yi)用(yong)(yong) 0.5 摩(mo)爾/升(sheng)鹽酸和(he) 0.5 摩(mo)爾/升(sheng)氯化鈉混(hun)合液再(zai)生處理,氯化鈉的(de)加入可防止纖維(wei)素在堿(jian)性溶(rong)液中膨脹而(er)難以(yi)過(guo)濾(lv)。陰(yin)離子(zi)(zi)交(jiao)換纖維(wei)素應避免(mian)在 pH 值小于(yu) 4 的(de)酸性溶(rong)液中放置過(guo)久,防止交(jiao)聯劑的(de)纖維(wei)素結構受到破(po)壞而(er)失效。